Wat achtergrondinformatie.
Allereerst moet worden opgemerkt dat Golgi-kleuring behoort tot de zogenaamde morfologische soorten kleuringen in de neurowetenschappen, waar de feitelijke anatomie van verschillende neuronen wordt onthuld (vergeleken met andere technieken, zoals Ca-beeldvorming of potentiële beeldvorming).
Ten tweede is Golgi-kleuring een soort zilverkleuring, daar de sedimentatie van zilver of zijn zouten (hier: zilverchromaat) onthult de morfologische eigenschappen van de cellen.
En ten derde wordt Golgi-kleuring toegepast op een gefixeerd preparaat. Dit betekent dat het weefsel (normaal gesproken een hersenplak) wordt voorbehandeld (hier: met formol) om alle cellen te doden en elk biologisch proces te stoppen.
Wat is er bekend over de doelen.
De gebruikelijke beschrijving van het doel wordt geciteerd als "een beperkt aantal willekeurige cellen in hun geheel". Dit is de essentie van Golgi-kleuring:
-
Alleen enkele cellen worden gekleurd , daarom is er geen belemmering voor aangrenzende celkleuring terwijl de morfologische structuur van de cellen (erg belangrijk voor lichtmicroscopie waar je input van verschillende diepten hebt geïntegreerd).
-
De cellen worden willekeurig gekleurd , er is geen voorkeur bekend onder neuronale cellen voor Golgi-kleuring en ik heb geen andere typen cellen in het CZS gezien die gekleurd zijn met Golgi, daarom is het vrij specifiek voor neuronale cellen (en laat macro- en microglia, astrocyten enz. intact) .
-
De cellen zijn in hun geheel gekleurd , wat betekent dat de volledige cel heel mooi gekleurd is, met gedetailleerde boomvorming van dendritische boom, dat was erg belangrijk bij het bestuderen van Purkinje-cellen in het cerebellum.
Is de kans groter dat grotere neuronen worden gekleurd? Zijn specifieke celtypen gevoeliger dan andere?
Golgi-kleuring wordt meestal gebruikt voor hersenplakjes (ik heb nog nooit de toepassing ervan op andere weefsels gezien of gehoord). Traditioneel is een van de grootste cellen hier piramide-neuronen (NA, ACh-ergic) en een van de kleinste zijn interneuronen (vaak GABA-ergic) - beide zijn vatbaar voor Golgi-kleuring ( referentie) en daar is geen schijnbaar clustering van gekleurde cellen door hun grootte of zendertype.
Wat weerhoudt ons ervan de geavanceerde moleculaire biologietechnieken te gebruiken om het proces te begrijpen?
Ik kan hiervoor verschillende redenen noemen:
-
Aangezien Golgi-kleuring wordt toegepast op een gefixeerd preparaat, is het weefsel al "beschadigd" (formol leidt tot uitdroging van cellen en verkruimelen), daarom Het is moeilijk om een aantal fijne moleculaire biologiemethoden te gebruiken om deze weefsels te onderzoeken.
-
Er is geen manier om van tevoren te zeggen welke cellen gekleurd worden. En zolang de microkristallisatie van zilverchromaat wordt gestart, kan deze niet (gemakkelijk) worden gestopt en teruggedraaid. Daarom is het moeilijk om achteraf te kijken wat de oorzaak is van de kleuring, dan wordt de hele cel geïmpregneerd met zilver.
-
Ik denk dat er geen echte pogingen zijn gedaan om het mysterie van deze kleuring te kraken : hoe interessant het ook is, dit lijkt een interdisciplinaire vraag op de grens tussen biologie en chemie. Dus misschien zal iemand er ooit eens naar kijken en alles uitleggen.