Vraag:
Waarom worden restrictie-enzymen niet ingevroren?
gkadam
2011-12-24 04:17:58 UTC
view on stackexchange narkive permalink

We weten allemaal dat restrictie-enzymen eiwitten zijn, maar we bevriezen ze nooit. Ze worden in plaats daarvan door bedrijven geleverd in oplossingen met een hoog glycerolgehalte en opgeslagen bij -20C. Is er een reden waarom dit zo is?

Twee antwoorden:
#1
+13
Mad Scientist
2011-12-24 04:56:50 UTC
view on stackexchange narkive permalink

Het is zo veel handiger om de enzymen klaar te hebben zonder ze te hoeven ontdooien. De belangrijkste reden dat je enzymen invriest, is om ze actief te houden. Als je een buffer bedenkt die ze ontdooit zonder de activiteit in gevaar te brengen, is dat een enorme toename in gemak.

De enzymen niet hoeven te ontdooien voor gebruik bespaart veel tijd, als het je lukt om de enzymen actief te houden in die niet-vriesomstandigheden, dat is een duidelijk voordeel.

Glycerol stabiliseert ook eiwitten in oplossing, en meervoudig invriezen en ontdooicycli kunnen de enzymactiviteit voor sommige enzymen negatief beïnvloeden.

Even een toevoeging: je kunt hetzelfde doen met antistoffen. Verdun ze bij ontvangst 1: 2 in glycerol en u kunt ze vermijden en u hoeft zich geen zorgen te maken over vriescycli (vergeet echter niet om de hoeveelheid te verdubbelen wanneer u ze gebruikt)!
Glycerol wordt ook toegevoegd als antivriesmiddel, zodat het enzym op lage temperatuur kan worden gehouden (lage kinetische energie) en daardoor langere tijd stabiel blijft.
#2
+5
Rob O'Callahan
2011-12-25 04:01:30 UTC
view on stackexchange narkive permalink

Vries-dooi cycli denatureren eiwitten door lokale effecten van pH-veranderingen

Een beetje beknopt? :)
Het komt wel duidelijk over.


Deze Q&A is automatisch vertaald vanuit de Engelse taal.De originele inhoud is beschikbaar op stackexchange, waarvoor we bedanken voor de cc by-sa 3.0-licentie waaronder het wordt gedistribueerd.
Loading...