Vraag:
Hoe lang behoudt LB met antibiotica een goede selectie?
Nick T
2011-12-15 03:19:44 UTC
view on stackexchange narkive permalink

Verschillende mensen in ons lab bereiden een liter of zo van LB, voegen kanamycine toe aan 25-37 mg / L voor selectie en bewaren het bij 4 ° C voor minipreps of andere kleine culturen (waar puur LB wordt gedoseerd met een 1000X voorraad is lastig). Sommigen denken dat het dubieus is om het na meer dan een week te gebruiken, maar we gebruiken routinematig kan-platen die 1-2 maanden oud zijn zonder nadelige gevolgen.

Hoe lang kan LB met antibioticum zoals kanamycine, chlooramfenicol of ampicilline worden bewaard bij 4 ° C en selectie behouden?

Drie antwoorden:
#1
+16
Dragana Bozic
2011-12-15 22:00:41 UTC
view on stackexchange narkive permalink

Dit Bitesize Bio-artikel is zeer informatief over dit onderwerp. De studie uit 1970 die ze aanhalen, vond een verwaarloosbare vermindering van de werkzaamheid van niet-bèta-lactamantibiotica (kanamycine, chlooramfenicol) over een tijdsbestek van 4 weken of 60 dagen. Ampicilline verliest ongeveer 10% activiteit na 4 weken.

In mijn laboratorium zorgen we er alleen voor dat we geen LB / Amp-platen gebruiken die ouder zijn dan 4 weken, voor LB / Km bewaren we ze bij 4 ° C voor meer dan een maand, verzegeld in een plastic zak.

#2
+3
user91
2011-12-15 06:51:23 UTC
view on stackexchange narkive permalink

Voor zover ik weet, is dat prima. Dat is de temperatuur waarop Amp regelmatig wordt opgeslagen. Ik doe sowieso altijd een negatieve controle om er zeker van te zijn dat mijn antibiotica nog steeds dodelijk zijn. Steek het gewoon niet in de magnetron om borden te maken

Ampicilline wordt afgebroken door hydrolyse (zij het zeer langzaam, zo niet gekatalyseerd), moeilijk in droge toestand, veel gemakkelijker in oplossing.
"Dat is de temperatuur waarop Amp regelmatig wordt opgeslagen" - en in feite verliest Amp daardoor activiteit (een paar procent per maand?).
#3
+3
Innab
2011-12-15 19:18:39 UTC
view on stackexchange narkive permalink

Ik weet niets over oplossingen, maar we houden LB-Amp / Carb / Gm-platen twee tot drie weken achter elkaar op 4 ° C en de antibiotica lijken te werken.



Deze Q&A is automatisch vertaald vanuit de Engelse taal.De originele inhoud is beschikbaar op stackexchange, waarvoor we bedanken voor de cc by-sa 3.0-licentie waaronder het wordt gedistribueerd.
Loading...